总糖实验报告范本

  糖在我们日常生活中随处可见,我们吃的米饭、水果、零食中或多或少都含有一些糖类。同时,糖也是我们维持机体运动所必不可少的物质,没有了它,就没有了能量的来源。我们这次便走进实验室探索糖类的奥秘。本次实验我们将用3,5—二硝基水杨酸法测定总糖和还原糖中的含糖量。本次实验中,我们除了要掌握还原糖和总糖的测定基本原理还要学习比色法测定还原糖的操作方法以及分光度法测定的原理和方法。

  首先,让我们一起来了解一下它们的测定方法吧。还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类,单糖都是还原糖,双糖和多糖不一定是还原糖,其中乳糖和麦芽糖是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。利用糖的溶解度不同,可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来,对没有还原性的双糖和多糖,可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定,再分别求出样品中还原糖和总糖的含量(还原糖以葡萄糖含量计)。还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物,3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系,利用分光光度计,在540nm波长下测定光密度值,查对标准曲线并计算,便可求出样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时,每断裂一个糖苷键需加入一分子水,所以在计算多糖含量时应乘以0.9。

  一、实验目的

  1、掌握还原糖和总糖的测定的基本原理

  2、学习比色法测定还原糖的操作方法 3、学习分光光度法测定的原理和方法

  二、实验原理

  还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基或酮基

  的糖类,单糖都是还原糖,双糖和多糖不一定是还原糖,其中乳糖和麦芽糖是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。利用糖的溶解度不同,可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来,对没有还原性的双糖和多糖,可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定,再分别求出样品中还原糖和总糖的含量(还原糖以葡萄糖含量计)。

  还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物,3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系,利用分光光度计,在540nm波长下测定光密度值,查对标准曲线并计算,便可求出样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时,每断裂一个糖苷键需加入一分子水,所以在计算多糖含量时应乘以0.9。

  三、材料与器具的准备。

  实验材料:面粉。 实验试剂

  (1)、1mg/mL葡萄糖标准液

  准确称取80℃烘至恒重的分析纯葡萄糖100mg,置于小烧杯中,加少量蒸馏水溶解后,转移到100mL容量瓶中,用蒸馏水定容至100mL,混匀,4℃冰箱中保存备用。

  (2)、3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂

  将6.3g DNS和262mL 2M NaOH溶液,加到500mL含有185g酒石酸钾钠的热水溶液中,再加5g结晶酚和5g亚硫酸钠,搅拌溶解,冷却后加蒸馏水定容至1000mL,贮于棕色瓶中备用。

  (3)、碘-碘化钾溶液:称取5g碘和10g碘化钾,溶于100mL蒸馏水中。 (4)、酚酞指示剂:称取0.1g酚酞,溶于250mL 70%乙醇中。 (5)、6M HCl和6M NaOH各100mL。 实验器材

  (1)具塞玻璃刻度试管:20mL×11(2)大离心管:50mL×2

  (3)烧杯:100mL×1 (4)三角瓶:100mL×1 (5)容量瓶:100mL×3

  (6)刻度吸管:1mL×1;2mL×2;10mL×1 (7)恒温水浴锅 (8)沸水浴 (9)分光光度计

  分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射下,产生了对光吸收的效应,物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系,也即符合比色原理——Lambert-Beer's law:

  数学表达式:

  A=lg(1/T)=KCL

  A为吸光度T为透射率,是投射光强度比上入射光强度

  C为吸光物质的浓度 L为吸收层厚度 K为吸收系数 物理意义是当一束平行单色光垂直通过某一均匀非散射的西光物质时,其吸光度A与吸光物质的浓度C及吸收层厚度L成正比.

  四、实验步骤。

  器材与材料准备完毕之后,便开始按照以下步骤进行实验。首先,制作葡萄糖标准曲线。取6支20mL 具塞刻度试管编号,按下表分别加入浓度为1mg/mL 的葡萄糖标准液、蒸馏水和3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂,配成不同葡萄糖含量的反应液。

  接下来,提取还原糖。准确称取2.00g 食用面粉,放入100mL 烧杯中,先用少量蒸馏水调成糊状,然后加入50mL 蒸馏水,搅匀,置于50℃恒温水浴中

  保温20min,使还原糖浸出。过滤,将滤液收集在100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,混匀,作为还原糖待测液。

  紧接着,提取总糖。准确称取1.00g食用面粉,放入100mL三角瓶中,加15mL蒸馏水及10mL 6M HCl,置沸水浴中加热水解30min(水解是否完全可用碘-碘化钾溶液检查)。待三角瓶中的水解液冷却后,加入1 滴酚酞指示剂,用6mol/LNaOH 中和至微红色,用蒸馏水定容在100mL容量瓶中,混匀。将定容后的水解液过滤,取滤液10mL,移入另一100mL容量瓶中定容,混匀,作为总糖待测液。

  然后,取4支20mL 具塞刻度试管,编号,6、7、8、9,按下表所示分别加入待测液和显色剂。

  最后,用分光光度计进行比色。先将机器打开预热20分钟。选择540nm的波长。再按MODE键切换到T,将黑体放入光路中,合上盖,0键校零。再按MODE键切换到A,将倒入比色皿中的0号液体放入到光路中,合上盖,100键校零。再将倒入比色皿中的各号液体放入到光路中即可测得光密度值。

原创文章,作者:fanwen,如若转载,请注明出处:https://fanwen.hongwu.com/66047.html

(0)
上一篇 2022年11月2日 下午3:11
下一篇 2022年11月2日 下午3:15

相关推荐

  • 物理仿真实验氢氘光谱拍摄实验报告范本

      一、实验目的   1.掌握氢氘光谱各谱线系的规律,即计算氢氘里德伯常数RH,RD的方法。   2.掌握获得和测量氢氘光谱的实验方法。   3.学习光栅摄谱仪的运行机理,并学会正…

    实验报告 2022年7月20日
  • “小学教师心理素质优化研究”实验总结

      “小学教师心理素质优化研究”在我们实验点开展五年了。这个课题的实验,适应教育改革发展、全面推进素质教育的需要,在我们学区收到了比预期更好的成效,有力地促进了广大教师心理素质的提…

    实验报告 2022年11月13日
  • 刺法灸法学实验报告模板

      一、 实验目的要求   1、 练习毫针进针手法。   2、 掌握行针手法。   3、 掌握毫针刺法。   二、 实验内容   1、 掌握毫针进针,体会进针时的得气感。   2、…

    实验报告 2022年7月22日
  • 筛板精馏塔精馏实验报告范文

      筛板精馏塔精馏实验   6.1实验目的   1.了解板式塔的结构及精馏流程   2.理论联系实际,掌握精馏塔的操作   3.掌握精馏塔全塔效率的测定方法。   6.2实验内容 …

    实验报告 2022年10月17日
  • 直流发电机的工作特性实验报告范文

      篇一:直流发电机实验报告   一、实验目的   1、掌握用实验方法测定直流发电机的各种运行特性,并根据所测得的运行特性评定该被试电机的有关性能。   2、通过实验观察并励发电机…

    实验报告 2022年9月26日
  • 测量血压实验报告

    篇一:血压测量的实验报告   血压测量的实训报告   姓名: 性别: 班级: 学号:   实训内容:血压测量(水银台式血压计)   实训地点:护理实训楼437农村医学实训室   实…

    实验报告 2022年8月25日
  • 关于观察与品尝食品的实验报告

      一. 实验目的:   通过观察食品外在的形状和颜色特点及通过品尝食品来了解自己的各种感觉器官的灵敏性.   二. 实验方法:   1, 视觉:通过视觉观察商品的外形特点和颜色等…

    实验报告 2022年8月3日
  • 高中学生生物实验报告

      一、实验目的:   1、学会如何使用显微镜观察细胞;   2、了解细胞的结构;   3、学会制作临时装片。   二、实验材料:(实验材料可换)松针、动物血液、动物神经细胞永久装…

    实验报告 2022年10月12日
  • 优秀地理学实验报告

      一、实验目的   1. 利用ArcCatalog管理地理空间数据库,理解Personal Geodatabse空间数据库模型的有关概念。   2. 掌握在ArcMap中编辑属性…

    实验报告 2022年12月13日
  • 中医实验报告的范文

      一、实验目的   为婴儿测量头围的好处在于能够掌握婴儿头围的生长速度,及时发现头围过大或过小的异常情况。如果小儿的头围明显超出正常范围,则可能患脑积水、巨脑症及软骨营养不良等疾…

    实验报告 2023年1月5日

发表回复

您的邮箱地址不会被公开。 必填项已用 * 标注